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流式細胞術檢測是用于細胞因子檢測的方法
點擊次數:1061 更新時間:2023-02-07
   細胞因子在體內具有重要的病理作用,在感染、炎癥、自身免疫病、免疫缺陷疾病等狀態下,部分細胞因子會明顯變化,根據這些指標可以判斷機體的免疫功能。血清、血漿或組織液中細胞因子檢測可以對疾病診斷和治療做出相應評價,具有重要的應用價值。廣泛應用于細胞生物學、免疫學以及腫瘤學等領域的流式細胞術是細胞因子檢測的一種方法。
  由于血清、細胞培養上清、積液中的細胞因子含量低,不容易檢測,加上樣本數量少,傳統的方法無法滿足多因子檢測。流式微球捕獲芯片技術(CBA)微量樣本多重蛋白定量技術,是用流式細胞儀對多重蛋白進行定量檢測的方法,能夠同時對樣本中的多個指標進行定性、定量檢測,可用于細胞因子檢測。
  流式細胞儀技術(FCM)技術可以應用流式細胞儀,結合單克隆抗體技術、免疫熒光染色技術,對快速流動液體中的單細胞進行多種參數測量和分析。CBA檢測系統采用聚苯乙/烯熒光微球連結特定的捕獲抗體,捕捉待測物,同時再加入待測物的熒光抗體,三者形成夾心復合物,通過流式細胞儀進行檢測。流式細胞術的優點是同時可以進行多參數檢測,快速并且信息量大。
  流式細胞術檢測用于細胞因子檢測是一種相對快速、重復性好并能準確定量的方法。但由于胞內分析步驟復雜,涉及變異因素多,可能會出現結果不穩定,較難重復等問題。
  如在檢測血清時,由于血清成分復雜,細胞因子含量差距大,實驗中經常會出現分群不明顯、微球聚集、濃度太低等現象,對實驗結果造成很大影響。如流式CBA法的微球由聚苯乙/烯材料制作而成,血清加入微球之后如果沒有充分渦旋,容易沉淀聚集,細胞因子不能充分跟微球結合,導致多群甚至聚集現象發生,檢測結果將是無效的。需要從制備混合微球開始到加入實驗管,直到上機檢測前每一步都必須充分渦旋,以避免微球發生聚集。

滬公網安備 31011802001676號

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