細(xì)胞名稱(chēng) B95-8絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞
種屬 絨猴
組織來(lái)源 外周血
生長(zhǎng)狀態(tài) 懸浮細(xì)胞
培養(yǎng)條件 培養(yǎng)基類(lèi)型：RPMI1640培養(yǎng)基
FBS:10%
抗生素：雙抗
培養(yǎng)條件：37℃，CO2:5%
傳代方法 收到細(xì)胞后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)：
如果沒(méi)長(zhǎng)滿，將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺(tái)內(nèi)更換新鮮
培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。
如果細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿（約80%-90%）則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。
貼壁細(xì)胞傳代方法：
1棄去培養(yǎng)基，用不含鈣、鎂離子的PBS洗1-2次。
2加1ml0.25%的胰酶（含0.02%EDTA），讓胰酶與大部分細(xì)胞接觸
后放入37℃培養(yǎng)箱內(nèi)，隨時(shí)觀察細(xì)胞狀態(tài)變化，待細(xì)胞大部分變
圓后加*培養(yǎng)基終止消化。
懸浮細(xì)胞傳代方法：可以直接傳代也可以離心法傳代。
1直接傳代是讓?xiě)腋〖?xì)胞慢慢沉淀在瓶底后，將上清吸掉1/2-2/3，
吹打細(xì)胞形成細(xì)胞懸液后，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)
培養(yǎng)。
2離心法傳代是將細(xì)胞連同培養(yǎng)液一并轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，1000rpm，
5分鐘，去除上清，加新的培養(yǎng)液到離心管內(nèi)，吹打細(xì)胞形成細(xì)胞
懸液后，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。
一般沒(méi)有特殊說(shuō)明，細(xì)胞一般是一傳二。
凍存方法 70%*培養(yǎng)基，20%FBS，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
儲(chǔ)存：液氮中長(zhǎng)期保存。
注 1觀察細(xì)胞在低倍鏡下觀察，便于整體估計(jì)細(xì)胞密度。
2在運(yùn)輸過(guò)程中可能會(huì)導(dǎo)致一些貼壁不牢的細(xì)胞發(fā)生部分脫落，可
離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。
3收到細(xì)胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、細(xì)胞污染等，請(qǐng)?jiān)谝恢軆?nèi)與我們
。
